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近期了解到有實驗人員反應,作WB實驗有失敗的情況,懷疑與實驗中使用的緩沖劑有關,可能是緩沖劑未滅菌或配制成溶液后感染了細菌導致的。那么WB實驗的失敗是否真的與緩沖劑染菌造成的呢? WB實驗即western blot蛋白質印跡實驗,或稱為免疫印跡實驗,是將電泳分離后的細胞或組織中蛋白質從凝膠轉移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質檢測技術。WB實驗失敗的原因有
EHSPT、MAOS等Trinder's試劑保存后會變色嗎?
在最近有客戶反應,自己配置好的EHSPT(也叫TOOS)溶液本來是透明的,可是放置了兩天后變成黃色或紅色了,這是什么原因,是否還能使用呢? Trinder's試劑溶液變色原因: 像EHSPT、MAOS等顯色底物都屬于新型Trinder’s試劑,都屬于高水溶性苯胺鈉鹽的衍生物,被氧化后會產生紅色或黃色的物質。Trinder’s試劑粉末是不容易被氧化的,配制成溶液后需要密封冷藏,盡量配多少用多少;如果
將蛋白質從凝膠轉移到固體支持物是蛋白質印跡的關鍵步驟。盡管這是一個簡單的過程,但仍需要一定程度的優化,具體取決于蛋白質的大小和凝膠的化學性質。在這里,我們提供了一些技巧,可以有效地將蛋白質從凝膠轉移到膜上。 1.根據蛋白質調整緩沖液 無論您是使用現有的實驗室方案還是出版物中的方案,都可能需要根據目標蛋白重新校準緩沖液配方。您可以將Towbin轉移緩沖液(25 mM Tris,192 mM甘氨酸,p
吖啶酯(NSP-SA-NHS)Cas199293-83-9及其相關化合物已被證明是非常有優勢的化學發光標記物,其穩定性、活性和敏感性超過了某些放射性同位素。吖啶酯能與含有一級氨基的蛋白發生反應。在堿性條件下,NHS作為離去基團被取代,蛋白質與吖啶酯形成穩定的酰胺鍵。反應完成后,多余的吖啶鹽通過脫鹽柱除去。 在存在堿性過氧化氫時,吖啶標記的蛋白不需要酶催化可自行發光。具體發光原理是在堿性過氧化氫溶液
公司名: 武漢德晟生化科技有限公司
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