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近期了解到有實驗人員反應,作WB實驗有失敗的情況,懷疑與實驗中使用的緩沖劑有關,可能是緩沖劑未滅菌或配制成溶液后感染了細菌導致的。那么WB實驗的失敗是否真的與緩沖劑染菌造成的呢? WB實驗即western blot蛋白質印跡實驗,或稱為免疫印跡實驗,是將電泳分離后的細胞或組織中蛋白質從凝膠轉移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質檢測技術。WB實驗失敗的原因有
如何選擇緩沖區 選擇緩沖區時,重要的是要考慮每個緩沖區的優缺點。首先,您計劃在實驗中使用的試劑的pH范圍必須與您選擇的緩沖液的pH范圍一致。其次,您必須考慮濃度,緩沖液毒性,溫度和反應性。緩沖液的濃度必須足以說明您計劃在實驗中使用的酸或堿的量。您計劃使用的pH改變成分越多,所需的緩沖液濃度就越高。緩沖液毒性非常重要,因為某些緩沖液可能會對正在使用的細胞產生毒性,因此,如果不確定毒性,可以在實驗中使
蛋白質的結構和功能需要在合適的pH值環境中才能維持,因此在蛋白的制備及純化過程中,生物緩沖液的選擇非常重要,只有合適的緩沖液才能保證蛋白的活性和結構穩定。 蛋白純化過程緩沖液作用 用于蛋白純化的緩沖劑有很多種,在維持體系的pH同時,要保證蛋白在純化過程中不能失活,或者是盡量減少蛋白失活的量,在蛋白純化的每一個步驟中都要保持蛋白的可溶性和活性。 蛋白純化緩沖液要求 蛋白純化過程中的緩沖液既要防止蛋白
Tris(三羥甲基氨基甲烷)是生化實驗中最常使用的緩沖液,因為它有好的緩沖能力、毒性低、對生物反應的干擾極低,而且純度很高。有超過磷酸鹽的趨勢,如在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中都已開始實驗TRIS緩沖液,很少再用磷酸鹽。在分子生物實驗中使用也很廣泛。 1、TRIS(三羥甲基氨基甲烷)的應用 ① 在電泳緩沖液中同甘氨酸構成緩沖體系穩定P值; ② 在凝膠中使用TRIS-HCL緩沖體系穩定PH值; ③
公司名: 武漢德晟生化科技有限公司
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